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病毒采樣管在新冠肺炎席卷全球時被人們所熟知,熟不知早在我們的日常檢驗和防治中就常規(guī)使用, 在防治畜禽疾病中,很多畜禽傳染病的臨床癥狀不明顯,單憑臨床經(jīng)驗是難以做到確切診斷、準(zhǔn)確用藥,往往因此而貽誤了病情。為此,需要通過從病畜或尸體用病毒采樣管采取病料,進(jìn)一步做微生物學(xué)和血清學(xué)化驗,查清病原,進(jìn)而有針對性地采取相應(yīng)的防治措施,以達(dá)到預(yù)防、控制和撲滅傳染病的目的,同時減少臨床工作的盲目性,提高獸醫(yī)人員的技術(shù)水平,保護(hù)養(yǎng)殖戶的利益。而病料采集、保存、送檢的方法是否正確,直接影響到檢驗的結(jié)果和防治工作的開展,故采集檢測樣品是診斷檢測工作的重要內(nèi)容,另外采樣的時機(jī)是否適宜,樣品是否具有代表性,樣品處理、保存、運(yùn)送是否及時等,都會影響到檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
下面就如何正確地采集、保存、送檢病料等進(jìn)行歸納和整理,希望能夠?qū)鶎荧F醫(yī)和養(yǎng)殖戶提供一些借鑒。
一、采集原則
1,新鮮、具代表性,且足量:采集死禽樣本,夏天6小時之內(nèi)完成,冬天在24小時之內(nèi)完成:采集樣品的數(shù)量要滿足診斷檢測的需要,并留有余地,以備必要時復(fù)檢使用。
2,減少對病料的污染:在做尸體剖檢時,應(yīng)將尸體浸泡在消毒劑溶液中,防止羽毛及皮屑飛揚(yáng)對病料造成的污染;病料采集時,對采集病料的器械及容器必須提前消毒,減少因器械或盛放病料的容器對病料的污染:尸體剖開腹腔時,一時間采樣管采取病料,減少病料因暴露于空氣中而造成的污染。
3,典型采樣:選取未經(jīng)藥物治療、癥狀典型或病變明顯的樣品,如有并發(fā)癥,還應(yīng)兼顧采樣。
4,合理采樣:根據(jù)診斷檢測的要求,須嚴(yán)格按照規(guī)定采集各種足夠數(shù)量的樣品外,不同疫病的需檢樣品各異,應(yīng)按可能的疫病側(cè)重采樣。對未能確定為何種疫病的,應(yīng)全面采樣。
5,安全采樣:既要保護(hù)采樣人員,以要防止病原外泄,還要防止樣品受到污染。
6,迅速送檢:應(yīng)盡快送實驗室進(jìn)行檢測,延誤送檢時間,會影響到檢測質(zhì)量和結(jié)果的可靠性。
二、病料的采集方法
1,組織和實質(zhì)器官的采集:剖開腹腔后,必須注意腸管的完整。如需進(jìn)行細(xì)菌的分離培養(yǎng),要以燒紅的手術(shù)刀片燙烙臟器表面,使用經(jīng)火焰滅菌的接種針插入燙烙的部位,提取少量的組織或液體,作涂片鏡檢或接種于培養(yǎng)基上,進(jìn)行培養(yǎng)。
2,液體病料的采集:采集血液、膽汁、膿腫液、滲出物等液體病料,使用滅菌吸管或注射器,經(jīng)燙烙部位吸取病變組織的液體,將病料注入滅菌的試管中塞好棉塞送檢。
3,全血的采集方法:用滅菌注射器自雞的心臟或翅靜脈采血2-5毫升,注入滅菌試管中。建議加入少量的抗凝劑(3.8%拘攤酸鈉0.1一0.5毫升或檸檬酸鈉液,配制方法:葡萄糖2.05g、檸檬酸鈉0.8g、檸檬酸0.055g.氯化鈉0.42g,加蒸餾水至100mI高壓滅菌10磅八0分鐘。)
4,血清的采集方法:用滅菌注射器自禽的心臟或翅靜脈采血2毫升,注入滅菌的1.5m1離心管中擺成斜面,待血液凝固血清析出后,將血清吸出注入另一個滅菌試管中,備用。
5,腸道及腸內(nèi)容物的采集方法:選擇病變明顯部位的腸道,將內(nèi)容物棄掉,用滅菌生理鹽水沖洗干凈,然后將病料放入盛有滅菌的30%甘油鹽水緩沖液中送檢。亦可將腸管切開,用滅菌生理鹽水沖洗干凈,然后用燒紅的手術(shù)刀片燙烙粘膜表面,將接種針插入粘膜層,取少量病料接種于培養(yǎng)基上。采集腸內(nèi)容物則需用燒紅的手術(shù)刀片燙烙腸道漿膜層,將接種針插入腸道內(nèi),吸取少量腸內(nèi)容,放入試管中或?qū)в心c內(nèi)容的腸道兩端扎緊,去掉其它部分送檢。
6,皮膚及羽毛的采集:皮膚要選病變明顯部分的邊緣,采取少許放入滅菌的病毒采樣管中送檢;羽毛也要選病變明顯部分,用滅菌的刀片刮取羽毛及根部的皮屑少許,放入滅菌的試管中送檢:采集孵化室的絨毛需用滅菌鑷子采取出雛機(jī)出風(fēng)口的絨毛3-5克,放入滅菌的試管中送檢。